Osthol je prenilirani kumarin koji obiluje plodovima Cnidium monnieri Cusson (Umbelliferae). Ranije smo izolirali oshol iz plodova C. monnieri i izvijestili o antifibrotičkom djelovanju. Zabilježena je i različita biološka aktivnost ostolu, uključujući antitumorsko, protuupalno i neuroprotektivno djelovanje. U ovom istraživanju istražili smo aktivnost inhibicije melanogeneze ostol u stanicama melanoma B16F10. Pored toga, s obzirom na značaj prinosa ekstrakcije za daljnji razvoj kao kozmetičkih proizvoda, uvjeti za ekstrakciju maksimalnog prinosa od izolacije ostol iz plodova C. monnieri optimizirani su korištenjem metodologije površinske reakcije.
Materijali i metode
Biljni materijal
Plodovi vrste C. monnieri kupljeni su s lokalnog biljnog tržišta u Chungbuku, Koreja, u studenom 2013. godine. Identificirao ih je herbarij Farmaceutskog koledža na Nacionalnom sveučilištu Chungbuk, gdje je položen uzorak vaučera (CBNU201311-CM). Osthol je izoliran iz plodova C. monnieri kao što je ranije izvješteno (Shin i sur., 2011 Shin E, Lee C, Sung SH, Kim YC,
Hwang BY, Lee MK. 2011.Antifibrotska aktivnost kumarina iz ekstrakta plodova Cnidium monnieri u zvjezdanim stanicama HSC-T6. J Nat Med 65: 370–374. Čistoća osthola je> 98%, izmjerena HPLC analizom. 
Stanična kultura
B16F10 ćelije mišjeg melanoma dobivene su iz Američke zbirke kultura tipova (Manassas, VA). Stanice su kultivirane u Dulbeccovom modificiranom mediju Eagle (DMEM) uz dodatak 10% fetalnog goveđeg seruma (FBS), 100 IU / ml penicilina i 100 μg / ml streptomicina. Stanice su održavane na 37 ° C u vlažnoj atmosferi od 95% zraka-5% CO2.
Stanična održivost
B16F10 melanomi tretirani su ostholom u koncentracijama od 1, 3, 10 i 30 µM tijekom 72 sata. Stanična vitalnost procijenjena je testom 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazolij bromida (MTT) u čitaču ploča ELISA ploča.
Određivanje sadržaja melanina
B16F10 melanomi tretirani su s osteolom u koncentraciji od 1, 3 i 10 µM tijekom 72 sata. Nakon ispiranja sa fiziološkom otopinom puferiranom fosfatom (PBS), stanice su sakupljene, a melanin je solubiliziran vrtlogom u 1N NaOH-10% DMSO na 80 ° C. Sadržaj melanina izmjeren je vrijednosti apsorpcije na 405 nm sa sintetskim melaninom kao standardom.
Procjena aktivnosti tirozinaze
Inhibitorna aktivnost tirozinaze procijenjena je uporabom tirozinaze gljiva.
Zaključak
Osthol, kumarin plodova Cnidium monnieri, inhibira sadržaj melanina u stanicama melanoma B16F10 inhibicijom ekspresije gena melanogeneze, poput tirozinaze, TRP-1 i TRP-2. Pored toga, utvrđeno je da su optimizirani faktori ekstrakcije, poput ekstrakcijskog otapala, vremena ekstrakcije, i odnos uzorka / otapala, te da je prinos osthola u optimalnim uvjetima bio 15,0 mg / g osušenih uzoraka, što daje snažnu potporu ekonomskoj učinkovitosti. Stoga je ostol obećavajući prirodni spoj na području poremećaja pigmentacije i kozmetičke industrije.
Gdje kupujete visokokvalitetnu ostolu?
Xi'an prirodno polje biotehnika Co, Ltd kao prodavač i proizvodnja praška za osthol, koji je profesionalni proizvođač biljnih ekstrakata od 2005. godine. I sudjelujte na izložbi CPHI, Vitafoods i API od 2008. Osthole je jedan od jakih proizvoda. Ako su vam potrebni ovi proizvodi, kontaktirajte nas i posjetite njihovu web stranicu www.nfnutra.com ili pošaljite upit na info@natural-field.com u bilo kojem trenutku.